NEST 五层细胞培养角瓶 / 5-Layer TC Treated Flask
• Growth area: 870cm2
• TC treatment for better cell attachment
• Sterilized by E-Beam, non-pyrogenic
• Both plug seal cap and vent cap are available
• Tips: T
温馨提示：
使用五层细胞培养瓶时，必须非常小心地操心，避免操作过程中产生气泡。气泡能在挡板处形成一个虹吸桥，导致上层培养基慢慢流到最下一层。
1. 细胞悬浮液混匀：依实验要求的浓度准备细胞，在培养基瓶、培养瓶或其他容器中混匀。建议的工作容 积为每层30-50 mL。
2. 用移液管紧贴瓶壁缓慢地将液体加到五层细胞培养瓶中，避免产生泡沫或气泡（每次加液时移液管内液体可留少许）。
3.注意事项：10 mL移液管可以伸到培养瓶底部使培养基分散开，而25 mL移液管则只能伸到NEST标志的地方把液体分散开。
4. 把培养瓶有NEST标志那一侧朝向自己，顺时针倾斜45度左右放置一段时间，使瓶中各个隔层的液体达到平衡。
5.轻缓地将培养瓶水平放置於工作台上，有耐思标志那一面朝上。
6. 前后左右轻轻晃动多层瓶，液体会均匀分布在五个生长面上。
7.注意事项：摇晃的动作要轻柔，一方面是防止起泡，另一方面是要防止培养基渗漏到下层。
培养液的移除
1.抽吸法： ①抽吸的时候，将多层瓶倾斜45度，有NEST标记的一面朝向自己。 ② 将移液管伸到底部抽吸培养基，直到完全抽吸完。
2. 倾倒法：将有NEST标志的一面朝向自己，逆时针45度倾倒液体。注意事项：抽吸培养液时建议使用10ml移液管，才能将培养液吸尽。
细胞的收集
1. 用缓冲液清洗一遍以去除残留的血清，然后加入消化液（≥ 5 mL/层），混匀。
2. 消化约2 min（视细胞状况而定），用消化终止液中和消化液。
3.采用移液管抽吸法或倾倒法将细胞悬浮液置於离心管等容器中。
4. 用一定量的缓冲液冲洗多层瓶三次，将冲洗液分辨置於离心管中，混合数或传代接种。
| Cat.No. |
Cell Growth Area
（cm²）
|
Cap Style | Rcommended Medium Volume（mL） | TC | /Pack | /Case |
| 731001 | 870 | Plug Seal Cap | 100-150 | YES | 1 | 8 |
| 731002 | 870 | Vent Cap | 100-150 | YES | 1 | 8 |
